DNA測序 訂單注意事項

詳細信息:

產 品 說 明

安徽快三单选三同号推荐今天 www.crjnl.com 注意:每次訂單都需要填寫完整個人信息:姓名,單位,郵箱,電話等。
郵箱建議使用163.com/126.com/188.com等郵箱,填寫時請使用大寫字母。
請盡量填寫手機號,我們不會主動給您撥打手機,而是用來短信通知測序情況。

 樣品信息

  • 確保您樣品管上的編號和登記表上樣品編號一致,以免使您的樣品混淆。同時注意樣品編號不要超過8個字節,并不能出現漢字及特殊字符等(儀器不識別);
  • 必須確認單個樣品反應數及樣品反應總數,以免出現多測或漏測現象,造成疑問或不必要的糾紛;
  • 需要測通或單向測通的可以在表上注明,我們可以直接安排測通,節約您的測序時間。但注意:注明測通的我們將直接安排實驗,不再與您確認,所以有任何問題必須提前通知我們;
  • 菌液和質粒測序一定要寫明正確載體名稱和引物名稱,以便我們正確測序和核對您的測序疑問。
  • 如果是我處沒有的通用引物,請提供合適的引物測序。如您沒有引物也可以提供電子版的載體圖譜和序列(標明酶切位點和測序方向),我處可幫助設計引物后再安排測序。特別需要注意的是載體名稱一定寫全,以免用錯引物。 
    如:只寫T載體,而PGEM-T和PMD18-T這兩種T載體的引物是不能共用?;褂蠵MD18-T、PΜC18(118)、PΜC19(119)等系列載體測序引物不要寫正向(+,M13+,M13F)或反向(-,M13-,M13R),要注明M13F(-47)或M13R(-48),因為這類載體較特別。
  • 菌液測序請注意抗生素(我們備氨芐青霉素,卡那霉素)和培養基類型(我們備LB),如是我處沒有的,請您提供5ML新鮮菌液或質粒測序;
  • 有特殊結構的樣品 (如:拷貝數低、GC rich、有poly結構、發夾結構、重復序列、復雜結構等)

一定要在表上注明。這樣在安排實驗時我們可以有針對的改變實驗條件,提高這部分樣品的成功率。

 

 樣品要求

 菌樣

  • 需注明載體類型和抗性,我們常備Amp, Kan兩種抗生素,其他抗性自備;
  • 應為高拷貝質粒,對于低拷貝質粒(如pET載體等),請直接提供約3μg左右純化質粒;
  • 需培養的菌液:要求提供的量至少500μl過夜培養的菌液(培養時間必須在12小時以上),封口保存,防止交叉污染或滲漏;
  • 若是特殊抗生素:請提供5ML菌液或質粒用于測序;
  • 無需培養的菌液:要求提供的量至少為4ml已培養好的菌液;
  • 大量樣品測序:建議在96空板或者Eppendorf管中用牙簽穿刺培養;
  • 注意:關于噬菌體,我們絕對不收菌液,只收抽提好的質粒,請一定要注意;

 質粒(除特殊樣品,我們一般不建議客戶提供質粒)

  • 您自行抽提的質粒務必溶于20μl雙蒸水中,電泳檢測濃度大于100ng/μl濃度;
  • 如有可能,同時提供1ml左右含有相應質粒的菌液備用;
  • 若您要長期測序請您加大質粒的量,大質粒必需注明載體長度,拷貝數低也要注明;
  • 必須寫明載體名稱,插入片段長度;

 PCR已純化

  • 您自行純化的PCR產物務必溶于雙蒸水,濃度要求至少50ng/μl,量至少20μl以,濃度大于50ng/μl,并注明片段長度,長片段需適當增加量,便于核對樣品測序是否有問題,同時方便安排需要測通的樣品測序和拼接工作;
  • 若您要長期測序請您加大PCR純化產物的量;
  • 您回收的PCR產物務必為單一條帶,否則將無法測序或影響測序結果。

 PCR未純化

  • PCR未純化產物測序要求片斷長度大于100BP小于2KB,如大于2KB最好建議您克隆后測序,濃度要求至少50ng/μl,量至少50μl,并注明片段長度,便于核對樣品測序是否有問題,同時方便安排需要測通的樣品測序和拼接工作;
  • 建議您送PCR未純化產物是電泳可見的單一明亮的特異性條帶;
  • 核對所送樣品是否有滲漏現象,如有,建議您重新送樣。

 自備引物要求

  • 引物必須經過PAGE純化方可測序,濃度要求不低于5pmol/μl(或5μmol/L),體積大于 
    10μl(干粉也可,務必標明OD值);
  • 請提供引物全序列、PCR退火溫度,以供參考(引物長度18-22bp為宜),同時標明引物序列,以便幫助您更好地分析測序結果;
  • 隨機引物、標記引物和簡并引物不能用于測序。

 樣品與引物的保存

您提供的樣品沒有特殊情況我們保留二個月,引物沒有特殊情況我們保留一個月,超過期限將全部處理。如果您要用超過二個月的樣品或一個月引物測序請您重新提供樣品和引物。 


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